茶树咖啡碱合成酶基因TCS1的定点突变及体外表达分析

【类型】会议论文

【会议录名称】第十六届中国科协年会——分12茶学青年科学家论坛论文集

【作者】李萌萌 邓威威 金璐 Mohammad Wadud Bhuiya 余晓丹 张正竹 

【关键词】 甲基转移酶 茶树 咖啡碱合成酶 定点突变 N

【会议名称】第十六届中国科协年会——分12茶学青年科学家论坛

【日期】2014-01-01

【作者联系方式】安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室

【摘要】通过分析茶树咖啡碱合成途径中的N-甲基转移酶基因TCS1与ICS1、PCS1的蛋白质空间结构模型,找到了四个可能影响TCS1催化活性的关键位点进行定点突变,构建突变基因重组原核表达质粒pMAL-TMx并在表达菌株BL21(DE3)pLysS中高效表达。茶树咖啡碱合成酶TCS1的四个突变体分别是TM1:225位精氨酸(Arg)突变为组氨酸(His);TM2:317位缬氨酸(Val)突变为甲硫氨酸(M

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