安徽农业大学茶文化特色库
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茶树基因芯片的研制和初步应用
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作者:
赵丽萍 高其康 陈亮 王新超 姚明哲 来源:第四届海峡两岸茶业学术研讨会 年份:2006 文献类型 :会议论文 关键词: 定量PCR 基因表达谱 茶树 cDNA芯片
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描述:利用EST计划获得的1680个基因片段,制备了国内外首张茶树cDNA芯片, 芯片上每个基因设置一个重复,共含有6912个点,其中6720个靶基因,160个阳性对照,32个阴性对照。4×4矩阵点制,共两个区域,每个区域的芯片密度为1037点/cm2,每张芯片可进行两次杂交。用3个茶多酚含量有差异的品种与芯片进行了杂交, 获得了不同品种的基因表达谱及表达差异的基因;选取其中2个与茶叶香气密切相关的基因,采用荧光定量PCR的方法进行了验证,基因表达变化趋势与芯片检测结果一致,验证了cDNA芯片杂交结果的可靠性。
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茶树新梢不同叶片中β-葡萄糖苷酶和β-樱草糖苷酶基因表达的实时定量PCR分析
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作者:
赵丽萍 陈亮 王新超 姚明哲 来源:长三角现代植物生物学与农业专题论坛论文集 年份:2005 文献类型 :会议论文 关键词: 实时定量PCR 茶树 樱草糖苷酶 葡萄糖苷酶
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描述:在建立了茶树基因表达的绝对定量实时PCR检测方法后,检测了龙井43新梢不同部位叶片中的β-葡萄糖苷酶和β-樱草糖苷酶基因的表达情况,结果表明?葡萄糖苷酶在一芽五叶新梢的第四叶中表达活性最高,为2.86E+08拷贝/μL,其次分别为第三叶>第五叶>第二叶>一芽一叶。而β-樱草糖苷酶在第二叶中拷贝数最高,为4.02E+06拷贝/μL,其次分别为:第三叶>第四叶>一芽一叶>第五叶。与茶叶香气密切相关两个基因在茶树不同部位的叶片中表达量和表达类型存在明显差异。本实验建立的实时荧光定量PCR可有效地用于茶树基因表达
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高含量β-胡萝卜素茶树资源的初步筛选
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作者:
王新超 陈亮 马春雷 张亚丽 梅菊芬 赵丽萍 姚明哲 来源:第四届海峡两岸茶业学术研讨会 年份:2006 文献类型 :会议论文 关键词: 胡萝卜素 茶叶 β 高效液相色谱法 资源
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描述::乙酸乙酯混合液(1:1)。色谱方法如下:HypersiI C18ODS柱,流动相为丙酮和水,梯度洗脱,检测波长为450nm。分析结果表明,本方法重现性好,平均加样回收率为99.2%,RSD为4.5
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茶树基因克隆、遗传转化研究进展及EST在茶树功能基因研究中的应用前景
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作者:
赵丽萍 陈亮 高其康 来源:中国茶叶学会第三届海峡两岸茶叶学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 遗传转化 EST 功能基因 茶树 基因克隆
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描述:本文综述了茶树功能基因克隆、遗传转化研究的最新进展,并对基于植物EST研究茶树功能基因的前景进行展望,以期为茶树分子生物学研究服务。
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茶树叶片ESTs序列及其功能基因表达谱特征分析
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作者:
赵丽萍 陈亮 高其康 来源:中国茶叶学会成立四十周年庆祝大会暨2004年学术年会 年份:2004 文献类型 :会议论文
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描述:在建立龙井43春季叶片cDNA文库后,进行了高通量的cDNA克隆测序,共获1684个高质量的表达序列标签(ESTs),并与NCBI的非冗余核酸与蛋白质数据库进行BlastN、BlastX比对,分别表明607个和1008个ESTs为已知功能或具推测功能基因,占总数的63.8%和28.7%。为了对茶树叶片基因表达谱有更加深入的了解,按照拟南芥功能基因分类标准,把BlastX比对结果中具有已知功能或推测功能的1008个ESTs,根据所参与的细胞过程将其分为12大类,即代谢相关基因占8.3%、能量相关基因占26.
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cDNA文库建立与ESTs测序分析:一个发现和鉴定茶树功能基因的高效快速新途径
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作者:
陈亮 赵丽萍 高其康 来源:中国茶叶学会第三届全国青年茶学学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 茶树种植 遗传育种 基因文库 龙井茶树
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描述:本文以Trizol-步法从龙井43春茶新梢中提取总RNA,分离纯化富含PolyA的mRNA,反转录合成双链cDNA,以λTripEX2为载体,构建了龙井43新梢cDNA文库。原始文库的滴度为6.8×105pfu,ml,总克隆数为3.5×105个,重组率为98.05%,扩增后文库总滴度为7.2×109pfu/ml。对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5-2.0kb之间,绝大部分在1.0-1.5kb左右。文库质量鉴定结果表明,构建的茶树新梢cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及
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构建茶树种质资源的核心种质
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作者:
王新超 杨亚军 陈亮 姚明哲 来源:中国茶叶学会第三届全国青年茶学学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 核心种质 茶树种植 遗传育种 种质资源
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描述:本文介绍了当前作物种质资源研究领域的一个新热点——核心种质的概念、原理和研究内容,指出在当前人力物力不足的情况下,构建茶树遗传资源的核心种质库是解决长期性的基础研究与生产实际的迫切需要之间矛盾的一种有效途径,并提出了构建茶树核心种质的三步程序和工作设想。
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茶树种质资源收集保存、鉴定评价及共享利用
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作者:
姚明哲 陈亮 王新超 来源:中国农业科学院2005年多年生和无性繁殖作物种植资源共享试点研讨会 年份:2005 文献类型 :会议论文
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描述:本文对国内外茶树种质资源收集保存、鉴定评价和共享利用方面的工作现状和进展进行了回顾,分析了现阶段中国茶树种质资源工作面临的问题,针对这些问题,提出了下一步工作思路.同时探讨了今后5~10年茶树种质资源的研究方向和重点任务,并提出了相应的保障措施.
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适用于茶树的ISSR-PCR反应体系研究
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作者:
姚明哲 王新超 陈亮 杨亚军 来源:中国茶叶学会第三届全国青年茶学学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 茶树种植 遗传育种 分子标记 龙井茶书
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描述:本文以龙井43为材料,对影响茶树ISSR-PCR的主要参数进行了研究,确定了适宜的ISSR-PCR反应条件。在20μl反应体系中,含10ng模板DNA,150nM引物,1×Buffer,1.5mM
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利用基因芯片筛选茶树芽叶紫化相关基因
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作者:
马春雷 姚明哲 王新超 金基强 陈亮 来源:第六届海峡两岸茶业学术研讨会 年份:2010 文献类型 :会议论文 关键词: 差异表达基因 基因芯片 茶树 紫芽
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描述:采用基因芯片技术对龙井群体中紫芽资源和绿芽资源进行分析,探索茶树紫化相关的差异表达基因。结果检测到差异表达基因43个,其中上调表达基因17个,下调表达基因26个。以基因芯片中紫芽资源上调基因TC0002e03和下调基因TL016D09、TL011D06,及不变基因TL022H08、TL024B05为材料,用实时荧光定量方法验证基因芯片的结果,二者完全相符。根据基因芯片的实验结果,采用数据库查询方式