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茶树基因克隆、遗传转化研究进展及EST在茶树功能基因研究中的应用前景
作者: 赵丽萍 陈亮 高其康  来源:中国茶叶学会第三届海峡两岸茶叶学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 遗传转化  EST  功能基因  茶树  基因克隆 
描述:本文综述了茶树功能基因克隆、遗传转化研究的最新进展,并对基于植物EST研究茶树功能基因的前景进行展望,以期为茶树分子生物学研究服务。
茶树叶片ESTs序列及其功能基因表达谱特征分析
作者: 赵丽萍 陈亮 高其康  来源:中国茶叶学会成立四十周年庆祝大会暨2004年学术年会 年份:2004 文献类型 :会议论文
描述:在建立龙井43春季叶片cDNA文库后,进行了高通量的cDNA克隆测序,共获1684个高质量的表达序列标签(ESTs),并与NCBI的非冗余核酸与蛋白质数据库进行BlastN、BlastX比对,分别表明607个和1008个ESTs为已知功能或具推测功能基因,占总数的63.8%和28.7%。为了对茶树叶片基因表达谱有更加深入的了解,按照拟南芥功能基因分类标准,把BlastX比对结果中具有已知功能或推测功能的1008个ESTs,根据所参与的细胞过程将其分为12大类,即代谢相关基因占8.3%、能量相关基因占26.
cDNA文库建立与ESTs测序分析:一个发现和鉴定茶树功能基因的高效快速新途径
作者: 陈亮 赵丽萍 高其康  来源:中国茶叶学会第三届全国青年茶学学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 茶树种植  遗传育种  基因文库  龙井茶树 
描述:本文以Trizol-步法从龙井43春茶新梢中提取总RNA,分离纯化富含PolyA的mRNA,反转录合成双链cDNA,以λTripEX2为载体,构建了龙井43新梢cDNA文库。原始文库的滴度为6.8×105pfu,ml,总克隆数为3.5×105个,重组率为98.05%,扩增后文库总滴度为7.2×109pfu/ml。对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5-2.0kb之间,绝大部分在1.0-1.5kb左右。文库质量鉴定结果表明,构建的茶树新梢cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及
茶树基因芯片的研制和初步应用
作者: 赵丽萍 高其康 陈亮 王新超 姚明哲  来源:第四届海峡两岸茶业学术研讨会 年份:2006 文献类型 :会议论文 关键词: 定量PCR  基因表达谱  茶树  cDNA芯片 
描述:利用EST计划获得的1680个基因片段,制备了国内外首张茶树cDNA芯片, 芯片上每个基因设置一个重复,共含有6912个点,其中6720个靶基因,160个阳性对照,32个阴性对照。4×4矩阵点制,共两个区域,每个区域的芯片密度为1037点/cm2,每张芯片可进行两次杂交。用3个茶多酚含量有差异的品种与芯片进行了杂交, 获得了不同品种的基因表达谱及表达差异的基因;选取其中2个与茶叶香气密切相关的基因,采用荧光定量PCR的方法进行了验证,基因表达变化趋势与芯片检测结果一致,验证了cDNA芯片杂交结果的可靠性。
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