安徽农业大学茶文化特色库
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茶树cDNA文库的构建及新梢特异表达基因EST序列分析
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作者:
赵丽萍 来源:中国农业科学研究院 年份:2004 文献类型 :学位论文 关键词: 表达序列标签 功能基因 茶树 新梢 cDNA文库
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描述:对龙井43文库进行较高通亮通量的EST测序和生物信息学分析.该研究获得的主要结果如下:1.以Trizol一步法从春茶新梢中提取总RNA,分离纯化富含Poly A的mRNA,LD...
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茶树基因克隆、遗传转化研究进展及EST在茶树功能基因研究中的应用前景
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作者:
赵丽萍 陈亮 高其康 来源:中国茶叶学会第三届海峡两岸茶叶学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 遗传转化 EST 功能基因 茶树 基因克隆
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描述:本文综述了茶树功能基因克隆、遗传转化研究的最新进展,并对基于植物EST研究茶树功能基因的前景进行展望,以期为茶树分子生物学研究服务。
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基于表达序列标签(EST)策略的茶树分子生物学研究
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作者:
陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽 来源:2007中国植物生理学会全国学术会议 年份:2007 文献类型 :会议论文 关键词: 文库 表达序列标签 RACE 芯片 cDNA 基因表达谱 茶树 基因克隆
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描述:表达序列标签是在人类基因组计划实施过程中,由美国国立卫生研究院生物学家 Venter 提出的发现基因的新战略。EST 技术已被广泛应用于新基因的克隆、组织特异性基因表达谱分析以及基因组序列的功能注释等许多研究领域,它已成为大规模获取功能基因的一种最为快捷和有效的研究手段。茶树是一种重要的木本经济植物,其分子生物学研究起步较晚,
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基于表达序列标签(EST)策略的茶树分子生物学研究
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作者:
陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽 来源:2007年全国茶业科技学术研讨会 年份:2007 文献类型 :会议论文 关键词: 分子生物学 表达序列标签 基因表达谱 茶树 cDNA文库 基因克隆
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描述:表达序列标签是在人类基因组计划实施过程中,由美国国立卫生研究院生物学家Venter提出的发现基因的新战略。EST技术已被广泛应用于新基因的克隆、组织特异性基因表达谱分析以及基因组序列的功能注释等许多研究领域,它已成为大规模获取功能基因的一种最为快捷和有效的研究手段。茶树是一种重要的木本经济植物,其分子生物学研究起步较晚,大大滞后于禾谷类与许多其他木本植物。最近,基于cDNA文库和EST测序分析技术的茶树分子生物学研究,包括基因表达谱特征分析、cDNA芯片建立与应用、EST-SSR/STR标记开发与应用、次
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基于表达序列标签(EST)策略的茶树分子生物学研究
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作者:
陈亮 赵丽萍 马春雷 张亚丽 来源:全国茶业科技学术研讨会 年份:2007 文献类型 :会议论文 关键词: 表达序列标签 RACE 芯片 基因表达谱 茶树 cDNA文库 基因克隆
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描述:表达序列标签是在人类基因组计划实施过程中,由美国国立卫生研究院生物学家Venter提出的发现基因的新战略。EST技术已被广泛应用于新基因的克隆、组织特异性基因表达谱分析以及基因组序列的功能注释等许多研究领域,它已成为大规模获取功能基因的一种最为快捷和有效的研究手段。茶树是一种重要的木本经济植物,其分子生物学研究起步较晚,大大滞后于禾谷类与许多其他木本植物。最近,基于cDNA文库和EST测序分析技术的茶树分子生物学研究,包括基因表达谱特征分析、cDNA芯片建立与应用、EST-SSR/STR标记开发与应用、次
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茶树叶片ESTs序列及其功能基因表达谱特征分析
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作者:
赵丽萍 陈亮 高其康 来源:中国茶叶学会成立四十周年庆祝大会暨2004年学术年会 年份:2004 文献类型 :会议论文
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描述:在建立龙井43春季叶片cDNA文库后,进行了高通量的cDNA克隆测序,共获1684个高质量的表达序列标签(ESTs),并与NCBI的非冗余核酸与蛋白质数据库进行BlastN、BlastX比对,分别表明607个和1008个ESTs为已知功能或具推测功能基因,占总数的63.8%和28.7%。为了对茶树叶片基因表达谱有更加深入的了解,按照拟南芥功能基因分类标准,把BlastX比对结果中具有已知功能或推测功能的1008个ESTs,根据所参与的细胞过程将其分为12大类,即代谢相关基因占8.3%、能量相关基因占26.
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cDNA文库建立与ESTs测序分析:一个发现和鉴定茶树功能基因的高效快速新途径
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作者:
陈亮 赵丽萍 高其康 来源:中国茶叶学会第三届全国青年茶学学术研讨会 年份:2003 文献类型 :会议论文 关键词: 茶树种植 遗传育种 基因文库 龙井茶树
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描述:本文以Trizol-步法从龙井43春茶新梢中提取总RNA,分离纯化富含PolyA的mRNA,反转录合成双链cDNA,以λTripEX2为载体,构建了龙井43新梢cDNA文库。原始文库的滴度为6.8×105pfu,ml,总克隆数为3.5×105个,重组率为98.05%,扩增后文库总滴度为7.2×109pfu/ml。对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5-2.0kb之间,绝大部分在1.0-1.5kb左右。文库质量鉴定结果表明,构建的茶树新梢cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及
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茶树新梢不同叶片中β-葡萄糖苷酶和β-樱草糖苷酶基因表达的实时定量PCR分析
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作者:
赵丽萍 陈亮 王新超 姚明哲 来源:长三角现代植物生物学与农业专题论坛论文集 年份:2005 文献类型 :会议论文 关键词: 实时定量PCR 茶树 樱草糖苷酶 葡萄糖苷酶
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描述:在建立了茶树基因表达的绝对定量实时PCR检测方法后,检测了龙井43新梢不同部位叶片中的β-葡萄糖苷酶和β-樱草糖苷酶基因的表达情况,结果表明?葡萄糖苷酶在一芽五叶新梢的第四叶中表达活性最高,为2.86E+08拷贝/μL,其次分别为第三叶>第五叶>第二叶>一芽一叶。而β-樱草糖苷酶在第二叶中拷贝数最高,为4.02E+06拷贝/μL,其次分别为:第三叶>第四叶>一芽一叶>第五叶。与茶叶香气密切相关两个基因在茶树不同部位的叶片中表达量和表达类型存在明显差异。本实验建立的实时荧光定量PCR可有效地用于茶树基因表达
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茶树基因芯片的研制和初步应用
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作者:
赵丽萍 高其康 陈亮 王新超 姚明哲 来源:第四届海峡两岸茶业学术研讨会 年份:2006 文献类型 :会议论文 关键词: 定量PCR 基因表达谱 茶树 cDNA芯片
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描述:利用EST计划获得的1680个基因片段,制备了国内外首张茶树cDNA芯片, 芯片上每个基因设置一个重复,共含有6912个点,其中6720个靶基因,160个阳性对照,32个阴性对照。4×4矩阵点制,共两个区域,每个区域的芯片密度为1037点/cm2,每张芯片可进行两次杂交。用3个茶多酚含量有差异的品种与芯片进行了杂交, 获得了不同品种的基因表达谱及表达差异的基因;选取其中2个与茶叶香气密切相关的基因,采用荧光定量PCR的方法进行了验证,基因表达变化趋势与芯片检测结果一致,验证了cDNA芯片杂交结果的可靠性。
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高含量β-胡萝卜素茶树资源的初步筛选
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作者:
王新超 陈亮 马春雷 张亚丽 梅菊芬 赵丽萍 姚明哲 来源:第四届海峡两岸茶业学术研讨会 年份:2006 文献类型 :会议论文 关键词: 胡萝卜素 茶叶 β 高效液相色谱法 资源
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描述::乙酸乙酯混合液(1:1)。色谱方法如下:HypersiI C18ODS柱,流动相为丙酮和水,梯度洗脱,检测波长为450nm。分析结果表明,本方法重现性好,平均加样回收率为99.2%,RSD为4.5