安徽农业大学茶文化特色库
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一种从富含次生代谢产物茶树嫩叶中高效提取基因组DNA的方法
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作者:
唐祥凯 谭和平 沈兴中 李怀平 许洋 管驰 来源:中国测试 年份:2015 文献类型 :期刊 关键词: DNA提取 稳定性分析 方法论 茶树
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描述:建立一种从富含次生代谢产物的茶树嫩叶中高效提取基因组DNA的方法。提出使用冷冻研磨机来破碎细胞,在确保低温环境保护下,快速、均匀地破碎茶树细胞,解决细胞破碎后易氧化、褐变的关键难点;同时在提取液中加入β-巯基乙醇等抗氧化剂进一步防止多酚类化合物的氧化;经过多次纯化有效去除多酚、多糖、蛋白质等杂质;所提取的基因组DNA经验证完整性好、纯度高,完全能进行酶切和聚合酶链式反应(PCR)。此外,进行系统性的方法学考察,结果表明该提取方法稳定、可靠、重现性好。该研究为茶树基因组DNA提取标准方法的建立奠定基础。